Principe de fonctionnement de l'électrophorèse des acides aminés

Électrophorèse des acides aminés

I- Objectif d'apprentissage: 

• Principe de l'électrophorèse des acides aminés

• Fonctionnement de l'électrophorèse des acides aminés

II- Technique de l'électrophorèse: 

• L'électrophorèse est une méthode de séparation de particules chargées électriquement par migration différentielle sous l'action d'un champ électrique.

• Le terme d'ionophorèse est utilisé dans le cas d'ions de petite taille. 

III- Explication du principe de l'électrophorèse d'un acide aminé: 

À chaque acide aminé correspond une valeur de pH isoélectrique (nous calculons le pHi grâce à la structure de l'acide aminé correspondant à différents pK), pHi auquel les acides aminés sont électriquement neutres. 

En dehors de ce "point isoélectrique" les acides aminés sont globalement chargés et migrent sous l'effet d'un champ électrique.

Ainsi, en travaillant à un pH fixé (dans une solution tampon), on peut séparer différents acides aminés par électrophorèse.

Une solution " tampon " présente une très faible variation du pH quand on lui ajoute une faible quantité d'acide fort ou de base forte ou quand on la dilue modérément.

Lorsque des acides aminés sont placés dans un champ électrique, ils migrent vers l'électrode de polarité opposée, les molécules neutres ne migrant pas.

Ainsi:

• Quand pH > pHi → l'acide aminé a une charge globale négative: il migre vers l'électrode positive (anode).

• Quand pH < pHi → l'acide aminé a une charge globale positive: il migre vers l'électrode négative (cathode).

• Quand pH=pHi → l'acide aminé est sous la forme zwitterion (neutre): il ne migre pas et reste au point de départ.

La charge globale portée par les différentes formes ioniques de l’acide aminé en solution dépend de la valeur du pH de la solution.

La charge électrique globale est nulle lorsque le pH de la solution est égal au pHi. Elle est positive lorsque le pH de la solution est inférieur au pHi et négative lorsque le pH de la solution est supérieur au pHi.